News

Gratias tibi ago pro natura.com adire.Versio navigatoris utens quam subsidia limitata CSS habet.Ad optimam experientiam commendamus ut navigatro renovato uteris (vel inactivare Compatibilitas Modus in Penitus Rimor).Interea, ut subsidia continua conservent, locum sine stylis et JavaScript reddemus.
Photosensitizers efficaces sunt imprimis magni momenti pro usu clinico divulgato phototherapiae.Tamen plerumque photosensitatores conventionales patiuntur brevem effusio necem, photostabilitatem sufficientem, quantum cedunt oxygeni reactivae speciei (ROS), et aggregatio exstingui-ductus ROS.Hic referimus prope-infrared (NIR) photosensitizer supramoleculares (RuDA) mediatam congregationem sui Ru(II)-arene organometallicorum complexorum in aquea solutione.RuDA solum oxygenium singletum (1O2) generare potest in statu aggregato, et manifestam ostendit aggregationem morum genera- 1O2 inducta ob notabilem augmentum in processu transversali inter systema singlet-tripletum.Sub actione 808 nm lucis laseris, RuDA 1O2 quantum cessus ostendit 16.4% (FDA probatae indocyaninae viridis: ΦΔ=0.2%) et altam conversionem photothermalem efficientiam 24.2% (auri nanorodorum commercialium) cum optima photostabilitate.: 21.0%, auri nanoshelli: 13.0%).Praeter, RuDA-NPs cum bono biocompatibilitatis in locis tumoris preferentially accumula potest, regressionem tumorem significantem faciens in therapia photodynamica cum 95.2% reductione in volumen tumoris in vivo.Haec aggregatio-enhancans photodynamic Lorem consilium praebet ad explicandum photosensitizers cum secundis proprietatibus photophysicis et photochemicis.
Comparatur ad therationem conventionalem, therapia photodynamica (PDT) tractatio attractiva est cancri ob commoda sua significantia ut accurate spatiotemporalem potestatem, non-invasivitatem, resistentiam medicamentorum neglegentiam, et minimizationem effectuum laterum 1,2,3.Sub luce irradiatione adhibiti photosensititores excitari possunt ad species oxygeni reciprocos valde formandas (ROS), quae ad apoptosin/necrosim vel responsiones immunes 4,5. Maxime tamen photosensitizers conventionales, ut chlorini, porphyrini et anthraquinones, absorptionem relative brevem habent (frequency <680 um), ita in tenui acumine proveniens propter nimiam absorptionem moleculorum biologicorum (eg, hemoglobin et melanin) in visibiles region6,7. Maxime tamen photosensitizers conventionales, ut chlorini, porphyrini et anthraquinones, absorptionem relative brevem habent (frequency <680 um), ita in tenui acumine proveniens propter nimiam absorptionem moleculorum biologicorum (eg, hemoglobin et melanin) in visibiles region6,7. Однако большинство обычных фотосенсибилизаторов, таких как хлорины, порфирины и антрахиноны, обладают относительно коротковолновым поглощением (частота < 680 нм), что приводит к плохому проникновению света из-за интенсивного поглощения биологических молекул (например, гемоглобина и меланина) в видимая область6,7. Attamen frequentissimi photosensitizers sicut chlorins, porphyrins et anthraquinones brevibus necem habent absorptionem (< 680 um) resultantes in acumine tenui lumine ob nimiam effusio moleculorum biologicorum (eg hemoglobin et melanin) in regionem visibilem 6.7.< 680 nm），因此由于对生物分子（如血红蛋白和黑色素）的强烈吸收， .<680 nm HI HI Однако большинство традиционных фотосенсибилизаторов, таких как хлорины, порфирины и антрахиноны, имеют относительно коротковолновое поглощение (частота < 680 нм) из-за сильного поглощения биомолекул, таких как гемоглобин и меланин, что приводит к плохому проникновению света. Maxime autem photosensitizers traditionales sicut chlorins, porphyrins et anthraquinones brevibus necem habent absorptionem (frequency <680 um) ob validam effusio biomoleculorum sicut haemoglobinum et melaninum resultantes in levi penetratione tenui.Visibilis area 6.7.Ideo prope-infrared (NIR) photosensitizers absorbentis qui in 700-900 um reducuntur "fenestrae medicinales" bene aptae sunt ad phototherapiam.Cum lux prope ultrarubram per fibras biologicas minime absorbetur, potest ad profundiorem penetrationem et minus photodamage8 ducere.
Infeliciter, exsistentes NIR-absorbens photosensitizers plerumque pauperes photostabilitatem habent, humilem oxygeni singlet (1O2) capacitatem generandi, et aggregationem inducta 1O2 exstinguendi, quae limites eorum applicationis clinicae 10.11.Etsi magni conatus factae sunt ad emendandas proprietates photophysicas et photochemicales de conventionalibus photosensitizers, tantum variae relationes nuntiaverunt NIR-absorbentes photosensitizers posse omnes has difficultates solvere.Plures praeterea photosensitizers promissionem efficiens 1O212,13,14 ostenderunt cum luce supra 800 um irradiata, cum energia photon in regione prope-IR celeriter decrescat.Triphenylamine (TFA) ut electron donatoris et [1,2,5] thiadiazole-[3,4-i] dipyrido [a, c] phenazine (TDP) ut electronico acceptor globi Donor-acceptor (DA) genus inficitur genus tingui, absorbentis prope infrared, quae late quaesitae sunt pro bioimaginatione II infrared et therapia photothermalia (PTT) ob angustias eorum fasciarum.Sic DA-typei colores ad PDT cum prope-IR excitatione adhiberi possunt, quamvis raro investigati sunt ut photosensitizers pro PDT.
Notum est altam efficientiam intersystematium transeuntium (ISC) photosensitariorum formationem 1O2 promovere.Commune consilium ad processum ISC progrediendum est augere iuncturam nentorum orbitae (SOC) photosensitizerorum, inducendis gravibus atomis vel specialibus instrumentis organicis.Sed aditus adhuc habet nonnulla incommoda et limitationes19,20.Nuper supramolecularis sui conventus praebet accessum solum intelligentem ad fabricandum materias functionis in gradu hypothetico, 21,22 multis commodis in phototherapy: (1) photosensitizers sui collecti potentiam habere possunt ad structuras vittae formandas.Similia structurae electronicae cum densiori distributione energiae gradus ob imbricatis orbibus inter caudices aedificantes.Ergo vis compositus inter singlet inferiorem statum concitatum (S1) et vicinum triplum concitatum (Tn) emendabitur, quod utile est ad processum ISC 23, 24 .(2) Coetus supramolecularis relaxationem non-radiatam reducet secundum motum intramolecularem mechanismum limitationis (RIM), qui etiam processus ISC 25, 26 promovet.(3) Coetus supramoleculares interiores moleculas monomerorum ab oxidatione et degradatione tueri potest, eo quod photosensitizer maxime augetur.Praemissis commodis, supramoleculares systemata photosensitizes supramoleculares positas esse credimus, alterutrum pollicens defectus PDT superare.
Ru(II) complexa fundata sunt medicamenta pollicentes applicationes potentiales in diagnosi et curatione morborum promissis ob singulares et amabiles biologicas proprietates 28, 29, 30, 31, 32, 33,34.Praeterea, abundantia concitatarum civitatum et proprietatum photophysicochemicarum tunable Ru(II) complexorum substructio magnas utilitates praebet ad progressionem Ru(II)-basis photosensitizers35,36,37,38,39,40.Notabile exemplum est polypyridyl complexum TLD-1433, quod in Phase II clinicis iudiciis sicut photosensitizer est ad curationem cancri non-musculi incursionis vesicae (NMIBC)41.Praeterea ruthenium (II) arene complexorum organometallicorum late adhibentur sicut agentia chemotherapeutica pro curatione cancri propter humilitatem toxicitatem et facilitatem modificationis 42, 43, 44,45.Proprietates ionicae Ru(II)-arene complexorum organometallicorum non solum pauperes solutionem DA chromophorum in communibus solventibus emendare possunt, sed etiam conventus DA chromophorum emendare possunt.Insuper structura pseudooctahedralis dimidia sandwich complexorum organometallicorum Ru(II)-arenes sterically impedire potest H-aggregationem DA-typi chromophorum, quo facilius formationem J-aggregationis cum vinculis redsorptionis redsorptionis expediat.Attamen, incommoda insita complexorum Ru(II)-arenorum, ut humilis stabilitas et/vel pauper bioavailability, therapeutica efficacia et viva actio complexorum arene-Ru(II) afficere potest.Attamen studia ostendimus haec incommoda superari posse complexionibus ruthenii encapsulando cum polymerorum biocompatibili per encapsulationem physicam vel coniugationem covalentis.
In hoc opere, complexiones DA-conjugatae Ru(II)-arene (RuDA) cum NIR felis per coordinationem vinculi inter DAD chromophorum et Ru(II) arenam medietatem referimus.Complexus inde in vesiculas metalosupramoleculares se convenire possunt in aqua propter interactiones non covalentes.Egregie conventus supramolecularis RuDA praeditus est polymerizatione inducto inter systema transitus proprietatum, quae efficientiam ISC significanter auctam, quae valde favorabilis erat PDT (Fig. 1A).Ad tumorem cumulum augendum et in biocompatibilitate vivo, FDA probata Pluronica F127 (PEO-PPO-PEO) usus est ad encapsulatum RuDA47,48,49 ad creandum RuDA-NP nanoparticulas (Figura 1B) quae ut plurimum efficiens PDT/Dual- agebat. mode PTT procuratorem.In phototherapia cancer (Figura 1C), RuDA-NP usus est ut mures nudi tractarent cum tumoribus MDA-MB-231 ad studium efficaciae PDT et PTT in vivo.
Schematica illustrationis mechanismi photophysici RuDA in monomeric et aggregatis formis phototherapiae cancri, synthesis RuDA-NPs et C RuDA-NPs pro NIR-activorum PDT et PTT.
RuDA, constans functionibus TPA et TDP, iuxta modum procedendi in Figura Supplementaria 1 (Figura 2A) demonstratum est, et RuDA ab 1H et 13C NMR spectris, electrospray ionizationis spectrometriae massae, et analysi elementaris (figurae suppletivae 2-4. ).Densitas electronicorum RuDA differentiae tabulae transitus singlet infimi computatus est a densitate temporis dependens theoriam functionis (TD-DFT) ad processum translationis pervestigandae observationis.Densitas electronica, ut patet in figura addita 5, maxime de triphenylamine ad TDP acceptoris unitatis post photoexcitationem fluit, quae attribui potest translationi transitus intramoleculari typico (CT).
Aes chemicae structura, B Absorptio spectra Orei in mixtis variis rationibus DMF et aquae.C effusio Normalised valorum RuDA (800 um) et ICG (779 um) versus tempus 0.5 W cm-2 inter 808 um lucis laser.D Photodegradatio ABDA indicatur a RuDA efducta formatione 1O2 in DMF/H2O mixturas cum diversis contentis aquae sub actione radiationis laseris cum nece 808 um et potentia 0.5 W/cm2.
Abstract-UV-visibilis effusio spectroscopia adhibita est ad studium propriae congregationis proprietates Ore in mixtis DMF et aquae variis rationibus.Ut in fig.2B, RuDA exhibet effusio vincula ab 600 ad 900 um in DMF cum cohorte maxima ad 729 um effusio.Moles aquae augendae ductae sunt ad effusionem gradatim rubram effusio Aes maximam usque ad 800 um, quod indicat J-aggregatio Ore in systematis congregati.Imaginum photoluminescentiae RuDA in diversis solventibus in Figura Supplementaria exhibita 6. RuDA videtur ostendere lucidum NIR-II typicum cum maximo emissione necem ca.ML um in CH2Cl2 et CH3OH, respective.Magna Stokes trabea (circiter 300 um) de RuDA significat notabilem mutationem in geometria status concitati et formatio statuum humilium energiae concitatarum.Luciscentia quantum reddit Ore in CH2Cl2 et CH3OH decreverunt esse 3.3 et 0,6%, respective.Attamen in mixtura methanoli et aquae (5/95, v/v), parva redstatio emissionis et diminutionis in quantitatis cede (0.22%) observata sunt, quae provenire possunt ad conventum Oreo-se. .
Ad visualem sui conventus ORE, liquida vi atomica microscopia (AFM) adhibita sumus ut mutationes morphologicas in ORE in solutione methanoli post aquam addito insinueremus.Cum aqua contenta infra 80% erat, nulla manifesta aggregatio observata est (Supplem. Fig. 7).Attamen, aucta in aqua contenta ad 90-95% amplius, apparuerunt nanoparticulae parvae, quae auto-conventus Aes indicaverunt. Praeterea laser irradiatio cum necem 808 um non afficit effusio intensio RuDA in aqueo. solutio (Fig. 2C et Accessiones Fig. 8).E contra, absorbentia indocyaninae viridis (ICG ut imperium) celeriter in 779 um delapsa est, egregiam de RuDA photostabilitatem significans.Praeterea stabilitas RuDA-NPs in PBS (pH = 5.4, 7.4 et 9.0), 10% FBS et DMEM (glucosa alta) ab spectroscopio UV-visibilis absorptionis spectroscopiae tempore variis punctis examinata est.Ut in Figura additamento demonstratum 9, leves mutationes in vinculis RuDA-NP absorptionis observatae sunt in PBS ad pH 7.4/9.0, FBS et DMEM, significantes egregiam stabilitatem RuDA-NP.Sed in medio acidico (рН = 5.4) hydrolysis Orestes inventa est.Etiam adhuc stabilitatem RuDA et RuDA-NP aestimavimus utentes methodi liquidae in chromatographia alta (HPLC) perpendenda sunt.Ut in Figura additamento ostenditur X, RuDA stabilis erat in mixtura methanoli et aquae (50/50, v/v) horae prima, et hydrolysis post 4 horas observata est.Sed solum apicem latum concavo-convexum pro RuDA NPs observatum est.Propterea globulus permeationis chromatographiae (GPC) adhibebatur ad stabilitatem RuDA NPs in PBS aestimandam (pH = 7.4).Ut patet in Figura additamento XI, post 8 horas incubationis sub conditionibus probatis, culmen altitudinis, cacumen latitudo et cacumen area NP RuDA signanter non mutaverunt, egregiam stabilitatem NP RuDA significans.Imagines praeterea TEM demonstraverunt morphologiam RuDA-NP nanoparticulorum paene immutatam mansisse post 24 horas in quiddam dilutum PBS (pH = 7.4, accessiones Fig. 12).
Quia conventus sui conferre potest diversas notas functiones et notas chemicae in Ore, animadvertimus emissionem acidum 9,10-anthracenediylbis (methylenae) dimalonicum (ABDA, indicator 1O2) in mixtionibus methanolo-aquarum.Aes diverso aqua content50.Ut ostenditur in Figura 2D et Figura additamenti 13, nulla degradatio ABDA observata est cum aqua contenta infra 20% erat.Crescente humiditate ad 40%, degradatio ABDA facta est, ut patet per diminutionem in intensio fluorescentiae ABDA.Observatum etiam est aquae superiores contenta in perniciem dejectionem consequi, suggerens RuDA congregationem sui necessariam et utilem ad abDA degradationem esse.Hoc phaenomenon multum differt a chromophoribus hodiernis ACQ.Cum laser in radiatum 808 um necem, quantum fructus 1O2 RuDA in mixtura 98% H2O/2% DMF est 16.4%, quod est 82 partibus altior quam ICG (ΦΔ = 0.2%) 51; demonstrans mirabilem efficientiam generationis 1O2 RuDA in statu aggregationis.
Electron deducit utentes 2,2,6,6-tetramethyl-4-piperidinone (TEMP) et 5,5-dimethyl-1-pyrroline N-oxydi (DMPO) sicut laqueos resonantiae spectroscopiae (ESR) adhibita est ad cognoscendas species consequentes. AFK.apud RuDA.Ut in Figura Supplementaria 14, confirmatum est 1O2 generari in irradiatione temporum inter 0 et 4 minuta.Praeterea, cum RuDA cum DMPO sub irradiatione incubabatur, notum typicum quattuor lineae EPR deprehensum est 1,2:1 DMPO-OH, adductio detecta est, formationem hydroxyli radicalis (OH·).Super, superiores eventus demonstrant RuDA facultatem ad productionem ROS per duplex genus I/II processus photosensitizationis incitandam.
Ut melius intelligamus proprietates electronicas RuDA in formis monomericis et aggregatis, orbitales limites moleculares RuDA in formis monomericis et dimericis utentes methodo DFT computatae sunt.Ut in fig.3A, summa occupatio orbitalis (HOMO) monomericae RuDA in ligando narum dislocata est et infima orbitalis molecularis vacua (LUMO) in TDP acceptante unita est.E contra, electronico densitas in dimericis HOMO contrahitur in ligando unius RuDA moleculi, dum densitas electronicorum in LUMO maxime contrahitur in acceptor unitatis alterius moleculi RuDA, quod indicat RuDA in dimer.Lineamenta CT.
A HOMO et LUMO ore in formis monomerics et dimericis computantur.B Singlet ac triplum energiae Ore in monomers et dimers gradus.C Aestimari gradus RuDA et possibilis ISC canales monomericos C et dimeric D. Sagittae ISC canales possibilis indicant.
Distributio electronicorum et foraminum in energia humilem simplicem statum RuDA commotum in formis monomericis et dimericanis per programmatum Multiwfn 3.852.53 evolvit, quae methodo TD-DFT computata sunt.Ut supra additur titulus indicatur.Foramina monomericana RDA, ut in figuris 1-2 ostenditur, plerumque per ligamen spinarum in his statibus excitantibus singillatim dilaceratae sunt, cum electrons plerumque in globo TDP sito, notas intramoleculares CT demonstrans.Praeter, his singlet statibus excitatis, plus minusve insidunt inter perforata et electronica, suggerens hos status concitatos singlet e excitatione locali aliquid conferre (LE).Dimersi enim, praeter lineamenta intramoleculares CT et LE, certa proportio linearum intermolecularium CT observata sunt in singulis civitatibus, praesertim S3, S4, S7, S8, innixa analysi intermolecularibus CT, cum CT transitus intermoleculares ut praecipuae. (Supplentary Table).3).
Ut melius experimentales eventus intelligamus, ulterius proprietates RuDA civitatum excitantium exploravimus ad explorandas differentias inter monomeros et dimersos (Tabulae supplementae 4-5).Ut in Figura 3B ostenditur, industria gradus singlet et trigeminis concitati status dimerorum multo densiores sunt quam monomerorum, qui adiuvat ad reducendum energiam inter S1 et Tn interstitium. Renuntiatum est transitiones ISC intra parvae energiae hiatus (ΔES1-Tn <0.3 eV) cognosci posse inter S1 et Tn54. Renuntiatum est transitus ISC comprehendi posse intra parvam energiam (ΔES1-Tn < 0.3 eV) inter S1 et Tn54. ообщалось, что переходы ISC огут быть реализованы в пределах небольшой энергетической ели (ΔES1эВи Tn<0. Relatum est transitiones ISC intra parvam energiam (ΔES1-Tn <0.3 eV) cognosci posse inter S1 et Tn54.ISC S1 Tn54 ES1-Tn <0.3 eV）内实现。ISC S1 Tn54 ES1-Tn <0.3 eV）内实现。 ообщалось, что переход ISC ожет быть реализован в пределах небольшой энергетической ели (ΔES1-Tn<0,3 . Renuntiatum est transitum ISC comprehendi posse intra parvae energiae hiatus (ΔES1-Tn < 0.3 eV) inter S1 et Tn54.Praeterea, una tantum orbitalis, occupata vel vacua, debet in ligatis singlet et tergeminis differre ut non-nullus SOC integralis provideat.Ita in analysi excitationis energiae et transitus orbitalis, omnes possibilis canales transitus ISC in Fig. monstrantur.3C,D.Notabiliter, unus tantum canalis ISC in monomer praesto est, dum forma dimerica quattuor ISC canales habet, qui transitus ISC augere possunt.Rationabile igitur est assumere quod quo plura moleculae RuDA aggregata sunt, eo magis pervia ISC canales erunt.RuDA aggregata structuras electronicas in singlet et tripla formare possunt, reducendo energiam intermedium S1 et praesto Tn, efficientiam ISC augentes ad generationis 1O2 facilitatem.
Ut ulterius mechanismum subjectam elucidare possimus, compositionem compositam arene-Ru(II) complexi (RuET) reponendo, duos ethylos circulos cum triphenylamine phenyl in RuDA (Fig. 4A) reponendo, ad plenam characterisationem vide ESI, Accessiones 15 -21 ) A donatore ad acceptorem (TDF), RuET easdem notas habet intramoleculares CT ac RuDA.Ut expectatur, effusio spectri RuET in DMF energiam trans- missionem ostendit cum valida effusio in regione ultrarubra prope in regione 600-1100 um (Fig. 4B).Praeterea RuET aggregatio etiam observata est cum aqua contenta augenda, quae in effusio maximi effusionis reflectebatur, quae ulteriore imaginatio AFM liquida confirmata est (Fig. 22).Eventus ostendunt RuET, sicut RuDA, status intramoleculares formare posse et in structuras aggregatas se convenire.
Chemical structure of RuET.B Absorptio spectra RuET in mixtis variis rationibus DMF et aquae.Insidiae C EIS Nyquist pro RuDA et RuET.Responsiones photocurrentes D de RuDA et RuET sub actione radiorum laseris cum necem 808 um.
Photodegradatio ABDA coram RuET aestimata est ab irradiatione cum laser cum necem 808 um.Mire nulla degradatio ABDA in variis aquae fractionibus observata est (Supplem. Fig. 23).Ratio possibilis est quia RuET non potest efficaciter structuram electronicam conglobatam formare, quia ethyla catena non promovet transferendi crimen efficientem intermolecularem.Impedimentum ergo spectroscopiae electrochemicae (EIS) et mensurae fluxae photocurrentis fiebant ad comparandas proprietates photoelectrochemicas RuDA et RuET.Secundum insidias Nyquist (Figura 4C), RuDA ostendit multo minorem radium quam RuET, quod significat RuDA56 velocius electronicum transportare intermolecularem et melius conductivity.Praeterea densitas photocurrentis RuDA multo altior quam RuET (Fig. 4D), confirmans meliorem causam translationis efficientiam RuDA57.Ita, coetus phenyl triphenylamine in Ore magni ponderis pertinet ad curam intermolecularem transferendo et formatione structurae electronicae electronicae comparando.
Ad tumorem cumulum et in vivo biocompatibilitate augendum, RuDA cum F127.Mediocris diametri hydrodynamicae RuDA-NPs decrevit esse 123.1 um cum stricta distributione (PDI = 0.089) utens methodum dynamicam spargens (DLS) (Figura 5A), quae tumorem cumulum augendo permeabilitatis et retentionis promovebat.esr)ectus.Imagines TEM demonstraverunt Ore NPs habere figuram sphaericam uniformem cum diametro 86 um mediocris.Egregie effusio maxima RuDA-NPs in 800 um (supplementum Fig. 24 apparuit), significans RuDA-NPs functiones et proprietates sui congregandi RuDAs retinere posse.Calculus initus ROS quantum cedat pro NP Ore est 15,9%, quod cum Aes comparabile est, proprietates photothermales RuDA NPs quaesitae sunt sub actione radiationis laseris cum necem 808 um camerae infraredae utendi.Ut in fig.5B,C, moderatio coetus (PBS tantum) expertus est levem intemperiem augendam, dum solutionis RuDA-NPs temperatura auctis calidis increscentibus celeriter augetur (ΔT) ad 15.5, 26.1, et 43.0°C.Concentrationes altae erant 25, 50, et 100 µM, respective, quae magnum effectum photographicum RuDA NPs indicat.Praeterea cycli calefactionis/refrigerandi mensuras ductae sunt ad stabilitatem photothermalem RuDA-NP aestimandam et cum ICG confer.Temperatura Ore NPs non decrevit post cyclos quinque calefactionis/refrigerationes (fig. 5D), quod significat eximiam stabilitatem photothermalem Ore NPs.E contra, ICG ostendit stabilitatem photothermalem inferiorem sicut ex apparente ablatione temperatus photothermalis campestris sub iisdem conditionibus.Secundum priorem methodum 58, efficientia photothermalia conversio (PCE) RuDA-NP computata est ut 24.2%, quae altior est quam materias photothermas exsistentes sicut nanorodes auri (21.0%) et auri nanoshelli (13.0%)59.Ita NP Ore exhibent proprietates optimas photothermales, quae promittunt PTT agentes.
Analysis imaginum DLS et TEM RuDA NPs (inset).B Imagines thermales variarum concentuum RuDA NPs radiorum laseris expositae ad necem 808 um (0.5 W cm-2).C Conversio Photothermalis curvarum variarum concentratione ore NPs, quae sunt datae quantitatis.B. D Augmentum caloris ORE, NP, ICG super 5 cyclos calefactionis refrigerationis.
Photocytotoxiciitas RuDA NPs contra MDA-MB-231 cellulae carcinomae humanae in vitro aestimata est.Ut in fig.6A, B, RuDA-NPs et RuDA exhibentur cytotoxicitatem neglegendam in absentia irradiationis, implicando obscuritatem toxicitatem inferiorum RuDA-NPs et RuDA.Autem, post exposita radiorum laseris ad necem 808 um, RuDA et RuDA NPs validam photocytotoxicitatem ostenderunt contra MDA-MB-231 cellulas cancer cum valores IC50 (concentratio dimidia maxima inhibitoriae) inter 5.4 et 9.4 μM, respective demonstrans quod RuDA-NP et RuDA potentiam habent pro phototherapia cancri.Praeterea, photocytotoxiciitas RuDA-NP et RuDA adhuc coram Vitaminum C (Vc), ROS scavenger explorata est, ut partes ROS in cytotoxicitate levi inducta elucidaret.Patet, cellula viability aucta post additionem Vc et IC50 valorum RuDA et RuDA NPs 25.7 et 40.0 µM fuerunt, respective, quae partes ROS magnas in photocytotoxicitate RuDA et RuDA NPs probat.Cytotoxicitas levis adducta RuDA-NPs et RuDA in MDA-MB-231 cellulae cancer vivae/mortuae cellae maculat utens calcein AM (fluorescens viridis pro cellis vivis) et propidium iodidum (PI, fluorescens rubra pro cellis mortuis).confirmata per cellulas) ut fluorescent speculatoria.Ut in Figura 6C demonstratum est, cellulae cum RuDA-NP vel RuDA tractatae sine irradiatione manserunt viabiles, ut patet per fluorescentiam viridem intensam.Contra, sub irradiatione laser, solum fluorescens rubra observata est, quae efficaciam photocytotoxicitatem RuDA vel RuDA NPs confirmat.Notabile est quod viridis fluorescens super accessionem Vc apparuit, quae violationem photocytotoxicitatis RuDA et RuDA NPs indicat.Hi eventus constantes sunt in vitro photocytotoxicitatis pertentationum.
Dose-dependens viability ipsius A RuDA- et B RuDA-NP cellulae in cellulis MDA-MB-231 coram vel absentia Vc (0.5 mM), respective.Claustra errorum, medium deviationis vexillum ± (n = 3). Incomparabilis, t postesque duo probat *p < 0.05, **p < 0.01, et ***p < 0.01. Incomparabilis, t postesque duo probat *p < 0.05, **p < 0.01, et ***p < 0.01. епарные двусторонние t-критерии *p <0,05, **p <0.01 и ***p <0.001. Duo cercopitheci t-probationes *p<0.05, **p<0.01, et ***p<0.001.t *p < 0.05、**p < 0.01 ***p < 0.001。t *p < 0.05、**p < 0.01 ***p < 0.001。 епарные двусторонние t-тесты *p <0,05, **p <0.01 и ***p <0.001. Duo cercopitheci t-probationes *p<0.05, **p<0.01, et ***p<0.001.C Vive/mortuae cellae analysin maculant utentes calcein AM et propidium iodidum sicut rimarum fluorescentium.Scala bar: 30 µm.Repraesentativae imagines trium biologicarum repetitarum ex unoquoque coetu ostenduntur.D Fluorescentiae Confocal imagines productionis ROS in MDA-MB-231 cellulis sub diversis condicionibus curationis.Viridis DCF fluorescens praesentiam ROS indicat.Irradiare laser cum necem 808 um cum potentia 0.5 W/cm2 pro 10 minutis (300 J/cm2).Scala bar: 30 µm.Repraesentativae imagines trium biologicarum repetitarum ex unoquoque coetu ostenduntur.E cytometria fluere RuDA-NPs (50 µM) vel RuDA (50 µM) curationis analysin cum vel sine 808 um laseris (0.5 W cm-2) coram et absentia Vc (0.5 mM) pro 10 min.Repraesentativae imagines trium biologicarum repetitarum ex unoquoque coetu ostenduntur.F Nrf-2, HSP70 et HO-1 of MDA-MB-231 cellulae cum RuDA-NPs (50 µM) tractatae vel sine 808 nm irradiatione laseris (0,5 W cm-2, 10 min, 300 J cm-2); cellas exprimere 2).Repraesentativae imagines duarum biologicarum repetitarum ex utroque coetu ostenduntur.
Productio intracellularia ROS in MDA-MB-231 cellularum dichlorodihydrofluorescein diacetate (DCFH-DA) methodo maculante examinata utens 2,7-dichlorodifluorescein.Ut in fig.6D, cellulae cum RuDA-NPs vel RuDA tractatae ostenduntur fluorescentia viridi distincta cum laser 808 um irradiata, indicans RuDA-NPs et RuDA facultatem efficientem generandi ROS habere.Immo, sine lumine vel coram Vc, signum tantum debile fluorescentium cellularum observatum est, quod ROS levem formationem indicabat.Gradus intracellulares ROS in cellulis RuDA-NP et RuDA affectis MDA-MB-231 cellulae cytometriae amplius determinatae sunt.Ut in Figura additamento ostenditur XXV, intensio fluorescens medium (MFI) generatum ab RuDA-NPs et RuDA sub 808 um irradiatio laserarum signanter aucta est per circiter 5.1 et 4.8 temporibus, respective ad regimen globi comparatum, eorum optimam formationem AFK confirmans.facultatem.Attamen gradus intracellulares ROS in RuDA-NP vel MDA-MB-231 cellulae cum RuDA tractatae erant tantum comparabiles cum controllis sine irradiatione laseris vel coram Vc, similes eventibus analysi fluorescentiae confocal.
Ostensum est mitochondriacum principale esse scopum Ru(II)-arenae complexorum60.Ergo investigata est subcellularis localisatio RuDA et RuDA-NPs.Ut in Figura Supplementaria 26, RuDA et RuDA-NP monstrantur similes profile distributionem cellularum cum summa cumulatione in mitochondria continente (62.5± 4.3 et 60.4 ± 3.6 ng/mg interdum respective).Tamen tantum parva copia Ru inventa est in fractionibus nuclei Ore et NP Ore (3.5 et 2.1% respective).Reliquae fracturae cellae ruthenium residuum continebant: 31.7% (30.6 ± 3.4 ng/mg interdum) pro RuDA et 42.9% (47.2 ± 4.5 ng/mg interdum) pro RuDA-NPs.In genere, Ore et NP Ore maxime in mitochondria congesta sunt.Ad dysfunctionem mitochondrialem perpendendam, JC-I et MitoSOX rubra maculavimus ad aestimandam membranam mitochondrialem potentialem et capacitatem productionis superoxidem, respective.Ut in Fig. 27 Accessiones ostensa sunt, viridis (JC-1) et rubra (MitoSOX Rubra) observata est in cellulis tractatis cum utroque RuDA et RuDA-NPs sub 808 nm irradiatione laser, significans utrumque RuDA et RuDA-NPs valde fluorescentium. Potest efficaciter membranam mitochondrialem depolarizationis et productionis superoxidis inducere.Praeterea mechanismus mortis cellae definitus est cytometriae fluxus usus innixus analysi annexin V-FITC/propidium iodide (PI).Ut in Figura 6E ostensum est, cum 808 um laser, RuDA et RuDA-NP irradiata induxerunt ratem apoptosin mane signanter auctam (inferiorem quadrantem) in cellulis MDA-MB-231 comparatis cum PBS vel PBS plus laseris.processionaliter cellas.Nihilominus, cum Vc adiecta est, apoptosis ratis RuDA et RuDA-NP signanter minuitur a 50.9% et 52.0% ad 15.8% et 17.8%, respective, quae confirmat partes praecipuas ROS in photocytotoxicitate RuDA et RuDA-NP..Praeterea parvae cellae necroticae in omnibus coetibus probatae (superioris quadrantis sinistri) observatae sunt, suggerentes apoptosim esse praedominantem formam mortis cellae a RuDA et RuDA-NPs inductam.
Cum damnum accentus oxidative maior est determinatio apoptosis, factor nuclearis cum erythroideo associatus 2, factor 2 (Nrf2) 62, clavis regulator systematis antioxidantis, in RuDA-NPs tractatum MDA-MB-231 exploratum est.Mechanismus actionis RuDA NPs ex irradiatione adductus.Eodem tempore, expressio thema amni interdum oxygenasi 1 (HO-1) etiam detectum est.Ut in Figura 6F et Figura additamenti ostenditur 29, RuDA-NP phototherapia mediata aucta Nrf2 et HO-I gradus expressionis coetus PBS comparati sunt, significans RuDA-NPs accentus oxidativas vias significans incitare.Praeter effectum de RuDA-NPs63 studere photothermal, expressio dapibus Hsp70 caloris concussa etiam aestimanda erat.Patet cellulas cum RuDA-NPs + 808 um irradiatione laser tractatas ostendisse expressionem Hsp70 auctam aliis duobus coetibus comparatis, responsionem cellulosam hyperthermiae reperentem.
Praeclarum in vitro eventus nos admonuit ut in vivo RuDA-NP perficiendo indagaremus in muribus nudis cum tumoribus MDA-MB-231.TEXTUS distributio RuDA NPs pervestigata est determinando contentum ruthenii in hepate, corde, splene, renibus, pulmone et tumoribus.Ut in fig.7A, maximum contentum Ore NPs in organis normalibus apparuerunt in prima observatione temporis (4 h), cum maximum contentum in tumore fibrarum 8 horarum post iniectionem determinatum est, forte ob Ore NPs.EPR efectus LF.Secundum proventus distributionis, optimalis curatio cum NP ore perdurat 8 horas post administrationem sumpta est.Ad illustrandum processum accumulationis RuDA-NPs in sitibus tumoris, proprietatibus photoacoustici (PA) RuDA-NPs moniti sunt, in recordatione PA signa RuDA-NPs, diversis temporibus post iniectionem, adhibita.Primum, signum PA RuDA-NP in vivo aestimatum est, recordantibus PA imagines tumoris situs post iniectionem intratumoralem RuDA-NP.Ut in Figura additamento demonstratur 30, RuDA-NPs signum fortem PA ostendit, et relatio positiva erat inter intentionem RuDA-NP et PA intensionem insignem (Figura suppletiva 30A).Tum, in vivo PA imagines situs tumoris post injectionem RuDA et RuDA-NP post injectionem intravenam descripti sunt diversis temporibus punctis post injectionem.Ut in Figura 7B ostenditur, PA signum RuDA-NPs e situ tumoris paulatim auctum cum tempore et in planitie ad 8 horas post-injectionem pervenit, congruens cum distributione textuum analysi ICP-MS determinati.Respectu RuDA (supplementariae Fig. 30B), maximus PA intensio signum apparuit 4 horarum post injectionem, significans ratem rapidam ingressum RuDA in tumorem.Praeterea mores excretorii RuDA et RuDA-NPs investigatum est determinando quantitatem ruthenii in urinis et lumbricis utendo ICP-MS.Praecipua via eliminationis pro RuDA (supplementariae Fig. 31) et RuDA-NPs (Fig. 7C) est per faeces, et efficax alvi RuDA et RuDA-NPs observatum est in periodo studiorum 8 dierum, quod significat RuDA. et RuDA-NPs a corpore sine diuturno toxicitate efficienter eliminari potest.
A. Ex vivo distributione RuDA-NP in fibris muscis a Ru contento determinato (percentage dosis de Ru (ID) per gram texti) diversis temporibus post iniectionem determinata est.Data sunt mediae declinationis vexillum ± (n = 3). Incomparabilis, t postesque duo probat *p < 0.05, **p < 0.01, et ***p < 0.01. Incomparabilis, t postesque duo probat *p < 0.05, **p < 0.01, et ***p < 0.01. епарные двусторонние t-критерии *p <0,05, **p <0.01 и ***p <0.001. Duo cercopitheci t-probationes *p<0.05, **p<0.01, et ***p<0.001.t *p < 0.05、**p < 0.01 ***p < 0.001。t *p < 0.05、**p < 0.01 ***p < 0.001。 епарные двусторонние t-тесты *p <0,05, **p <0.01 и ***p <0.001. Duo cercopitheci t-probationes *p<0.05, **p<0.01, et ***p<0.001.B PA imagines situum tumoris vivorum ad 808 um excitationem post administrationem intravenae RuDA-NPs (10 µmol kg-1), diversis temporis punctis.Post intravenosam administrationem RuDA NPs (10 µmol kg-1), C Ru a muribus cum urina et faecibus diversis temporibus excretum est.Data sunt mediae declinationis vexillum ± (n = 3).
Facultas calefactionis RuDA-NP in vivo studuit in muribus nudis cum MDA-MB-231 et RuDA tumoribus ad comparationem.Ut in fig.8A et accessiones Fig. 32, moderatio globi (salinae) minus ostendit mutationem temperaturae (ΔT ≈ 3°C) post 10 minuta expositionis continuae.Nihilominus temperatura RuDA-NPs et RuDA auctis cum maximis temperaturis 55.2 et 49.9 °C celeriter auctis, respective hyperthermia sufficiens praebens in justo cancri vivo.Observata incrementa in caliditate caliditatis pro RuDA NPs (ΔT ≈ 24°C) comparati RuDA (ΔT ≈ 19°C) ob meliorem eius permeabilitatem et cumulum in tumore textuum ob effectum EPR.
Imagines thermarum infraredarum murium cum MDA-MB-231 tumores radiati 808 um laser, diversis temporibus 8 horarum post infusionem.Repraesentativae imagines quattuor biologicae repetitae ex unoquoque coetu ostenduntur.B Tumor relativus volumen et C Mediocris massa tumoris murium in curatione diversa.D Curvae corporis pondera diversorum murium.Irradiare laser cum necem 808 um cum potentia 0.5 W/cm2 pro 10 minutis (300 J/cm2).Claustra errorum, medium deviationis vexillum ± (n = 3). Incomparabilis, t postesque duo probat *p < 0.05, **p < 0.01, et ***p < 0.01. Incomparabilis, t postesque duo probat *p < 0.05, **p < 0.01, et ***p < 0.01. епарные двусторонние t-критерии *p <0,05, **p <0.01 и ***p <0.001. Duo cercopitheci t-probationes *p<0.05, **p<0.01, et ***p<0.001.t *p < 0.05、**p < 0.01 ***p < 0.001。t *p < 0.05、**p < 0.01 ***p < 0.001。 епарные двусторонние t-тесты *p <0,05, **p <0.01 и ***p <0.001. Duo cercopitheci t-probationes *p<0.05, **p<0.01, et ***p<0.001. E H&E inficiens imagines organorum majorum et tumores e diversis coetibus curationis, inter Saline, Salina + Laser, RuDA, RuDA + Laser, RuDA-NPs, et RuDA-NPs + Laser coetus. E H&E inficiens imagines organorum majorum et tumores e diversis coetibus curationis, inter Saline, Salina + Laser, RuDA, RuDA + Laser, RuDA-NPs, et RuDA-NPs + Laser coetus. Изображения окрашивания E H&E основных органов и опухолей из разных групп лечения, включая группы физиологического раствора, физиологического раствора + лазера, RuDA, RuDA + Laser, RuDA-NPs и RuDA-NPs + Laser. E H&E inficiens imagines organorum majorum et tumores e diversis coetibus curationis, inclusa salina, salina + laser, RuDA, RuDA + Laser, RuDA-NPs, et RuDA-NPs + Laser coetus.E H&E + RuDA、RuDA + RuDA-NPs RuDA-NPs +E H&E Окрашивание E H&E основных органов и опухолей из различных групп лечения, включая физиологический раствор, физиологический раствор + лазер, RuDA, RuDA + лазер, RuDA-NPs и RuDA-NPs + лазер. E H&E inficiens organorum majorum et tumores e variis coetibus curationis incluso salina, salina + laser, RuDA, RuDA + laser, RuDA-NPs et RuDA-NPs + laser.Scala vectis: 60 µm.
Effectus phototherapiae vivae cum RuDA et RuDA NPs aestimatus est in quo muri nudi cum MDA-MB-231 tumores intravenously cum RuDA vel RuDA NPs injecti sunt ad unius dosis 10.0 µmol kg-1 per venae caudae, dein 8 horas post iniectio.Laser irradiatio cum adsum DCCCVIII um.Ut in Figura 8B demonstratum est, volumina tumoris in coetibus salinis et laseris insigniter aucti sunt, significans salina vel laser 808 irradiatio parum valere ad incrementum tumoris.Sicut in coetus salinarum, tumore celeri incrementi etiam observatus est in muribus, curatis cum RuDA-NPs vel RuDA in absentia irradiationis laseris, suam humilitatem obscuram toxicitatem demonstrans.E contra, post irradiationem laseris, curationem RuDA-NP et RuDA induxerunt significantes tumorem regressionem cum reductionibus tumoris in 95,2% et 84.3%, respective ad coetus salinorum tractatos, praestantes synergisticos PDT significans., mediante effectu RuDA/CHTV.- NP vel Ore, comparatus cum RuDA, RuDA NPs meliorem effectum phototherapeuticum ostendit, qui maxime propter EPR effectus RuDA NPs erat.Tumor incrementi inhibitionis eventus amplius aestimantur ab tumore pondere exciso in die 15 curationis (fig. 8C et accessiones fig. 33).Tumor medius in RuDA-NP, mures et RuDA curati mures tractati erant 0.08 et 0.27 g, respective, quod multo levius erat quam in globo moderante (1.43 g).
Praeterea pondus murium singulis tribus diebus conscriptum est ad studium obscurae toxicitatis de RuDA-NPs vel RuDA in vivo.Ut ostenditur in Figura 8D, nullae differentiae significantes in corpore ponderis observatae sunt ad omnes coetus curationis. Praeterea hematoxylinum et eosin (H&E) tinguere organorum maioris (cor, hepatis, splenis, pulmonis, renis) a diversis coetibus curationis susceptae sunt. Praeterea hematoxylinum et eosin (H&E) infectio organorum maioris (cor, hepatis, splenis, pulmonis, renis) ex diversis coetibus curationis fiebant. Кроме того, было проведено окрашивание гематоксилином и эозином (H&E) основных органов (сердца, печени, селезенки, легких и почек) из разных групп лечения. Praeterea hematoxylin et eosin (H&E) inficiens organis maioribus (cordis, hepatis, splenis, pulmonis, renum) ex diversis coetibus curationis fiebat.(H&E) (H&E) Кроме того, проводили окрашивание гематоксилином и эозином (H&E) основных органов (сердца, печени, селезенки, легких и почек) в различных группах лечения. Praeterea hematoxylinum et eosin (H&E) infectio organorum maiorum (cor, hepatis, splenis, pulmonis, renis) in diversis coetibus curationis fiebat.Ut in Fig.8E, H&E maculas imagines quinque organorum majorum e RuDA-NPs et RuDA circulos nullas abnormitates vel damna organi manifesta exhibent. 8E, H&E maculas imagines quinque organorum majorum e RuDA-NPs et RuDA circulos nullas abnormitates vel damna organi manifesta exhibent.Ut in fig.8E, изображения окрашивания H&E пяти основных органов из групп RuDA-NPs и RuDA не демонстрируют явной ананоп. 8E, H&E maculantia imagines quinque organorum majorum e RuDA-NPs et RuDA circulos nullas abnormitates vel laesiones organi manifesti ostendunt.8E RuDA-NPs RuDA H&E8E RuDA-NPs RuDA H&E ак показано на рисунке 8E, изображения окрашивания H&E пяти основных органов из групп окраения окрашивания H&E пяти основных органов из групп окраения окрашивания H&E пяти основных органов из групп окраения окрашивания H&E пяти основных органов из групп окраивания H&E пяти основных из рупп. Ut in Figura 8E, H&E ostenduntur imagines quinque organorum majorum e RuDA-NPs et RuDA inficiendo nullas abnormitates vel damnum organi manifestas ostenderunt.Hi eventus ostenderunt neque RuDA-NP neque RuDA signa toxicitatis in vivo monstrasse. H&E autem tumorum imagines inficiens ostendit utrumque RuDA + Laser et RuDA-NPs + Laser circulos gravem cancri cellam perniciem facere posse demonstrans egregium efficacia phototherapeutica vivo RuDA et RuDA-NPs. H&E autem tumorum imagines inficiens ostendit utrumque RuDA + Laser et RuDA-NPs + Laser circulos gravem cancri cellam perniciem facere posse demonstrans egregium efficacia phototherapeutica vivo RuDA et RuDA-NPs.Praeterea imagines hematoxylin-eosin tumore maculato ostenderunt utrumque RuDA+Laser et RuDA-NPs+Laser coetus gravem perniciem cellularum cancri induci posse demonstrans superiorem phototherapeuticam efficaciam RuDA et RuDA-NPs in vivo.H&E RuDA + Laser RuDA-NPs + Laser RuDA RuDA-NPs .RUDA + laser ruda-nps + laser RUDA RUDA-nps .Praeterea hematoxylin et eosin tumore maculato imagines ostenderunt utrumque RuDA+Laser et RuDA-NPs+laser catervas in gravibus cellulis canceris perniciem consecutos demonstrans superiorem phototherapeuticam efficaciam RuDA et RuDA-NPs in vivo demonstrans.
In fine, Ru(II)-arene (RuDA) complexum organometallicum cum ligandis DA type destinatum est ut processus ISC faciliorem redderet methodum aggregationis utens.RuDA summatim se convenire potest per interactiones non covalentes ad systemata RuDA supramolecularis derivata, quo facilius 1O2 formationem efficiat et conversionem photothermalem efficiens ad cancrum levem curationem inductam.Notabile est quod monomeric RuDA 1O2 sub laser irradiatione in 808 um non generavit, sed magnam quantitatem 1O2 in statu aggregato generare potuit, rationalitatem et efficientiam consilii nostri demonstrans.Investigationes subsequentes ostenderunt conventum supramolecularem RuDA cum melioribus proprietatibus photophysicis et photochemicis dotare, ut effusio redsortio et resistentia photobleaching, quae valde expetenda sunt processus PDT et PTT.Tam in vitro quam in experimentis vivo ostendimus RuDA NPs cum bono biocompatibilitate et cumulatione boni in tumore praeclaram lucem inductam anticancer activitatem in laser irradiatione ad necem 808 um.Ita, RuDA NPs ut bimodales supramoleculares PDT/PTW efficaces reagentes ditabunt statutum photographematicorum actuorum ad aequalitatem supra 800 um.Consilium rationis systematis supramolecularis efficacem praebet iter ad photosensitatores NIR-activated cum effectibus praestantibus photosensitizing.
Omnes oeconomiae et menstruae ex mercatoribus commeatus impetratae et sine ulteriori purificatione usi sunt.RuCl3 emptus a Boren Metallis Pretiosis Co., Ltd. (Kunming, China).[(η6-p-cym)Ru(fendio)Cl]Cl(fendio = 1,10-phenanthroline-5,6-dione) et 4,7-bis[4-(N,N-diphenylamino)phenyl]-5 ,6-Diamino-2,1,3-benzothiadiazole peractum est secundum priora studia 64,65.NMR spectra in Bruker Avancia III-HD 600 MHz spectrometri in Universitate Australi analytica Test Centre d6-DMSO vel CDCl3 adhibita solvendo sunt.Mutationes chemicae δ in ppm dantur.quoad tetramethylsilanam, et constantium commercium J dantur in valoribus absolutis in Hertz.Massa spectrometriae alta resolutio (HRMS) fiebat in instrumento agili 6224 ESI/TOF.Analysis elementaris C, H, N facta in Vario MICROCHNOS analysi elementi (Elementar).spectra visibilia UV in spectrophotometro Shimadzu UV3600 mensurata sunt.spectra fluorescens in Shimadzu RF-6000 spectrofluorimetris scripta sunt.EPR spectra scripti sunt in instrumento EMXmicro-6/1 a Bruker.Morphologia et structura exemplorum praeparatorum studuerunt in FEI Tecnai G20 (TEM) et Bruker Icon (AFM) instrumentis operantibus in intentione 200 kV.Lux dynamica dissipatio (DLS) fiebat in Nanobrook Omni analyser (Brookhaven).Proprietates photoelectrochemicae mensuratae sunt in paroe electrochemico (CHI-660, China).Imagines photoacousticae adhibitae sunt utens systema visualSonics Vevo® LAZR FUJIFILM.Imagines confocales adhibitae sunt Olympum in Microscopio FV3000 confocale.Analysis FACS fiebat in cytometris BD calibur.Alta perficiendi liquida chromatographia (HPLC) experimenta in aquis Foederis e2695 systematis adhibita 2489 UV/Vis detectoris fiebant.Gel Permeation Chromatographia (GPC) exposita sunt in Thermo ULTIMO 3000 instrumento adhibito ERC RefratoMax520 indice detectore refractivo.
[(η6-p-cym)Ru(fendio)Cl]Cl(fendio = 1,10-phenanthroline-5,6-dione)64 (481.0 mg, 1.0 mmol), 4,7-bis[4 -(N. N-diphenylamino)phenyl]-5,6-diamino-2,1,3-benzothiadiazoli 65 (652.0 mg, 1.0 mmol) et acidum aceticum glaciale (30 mL) ad refrigerationem refluentis per 12 horas excitatae sunt.Solvendo tunc in vacuo remotum est utens evaporatore gyratorii.Residuum inde resultans per chromatographiam columnae mico (gel, CH2Cl2:MeOH=20:1) residua purificata est ut RuDA viridis pulveris (cedat: 877,5 mg, 80%).culus.Rationes pro C64H48Cl2N8RuS: C 67,84, H 4.27, N 9.89.Inventus: C. 67.92, H. 4.26, N 9.82.1H NMR (600 MHz, d6-DMSO) δ 10.04 (s, 2H), 8.98 (s, 2H), 8.15 (s, 2H), 7.79 (s, 4H), 7.44 (s, 8H), 7.21 (d. J = 31.2 Hz, 16H), 6.47 (s, 2H), 6.24 (s, 2H), 2.69 (s, 1H), 2.25 (s, 3H), 0.99 (s, 6H).13c nmr (150 MHZ, D6-DMSO), δ (PPM) 158.03, 152.81, 149.31, 147.98, 147.16, 139.98, 136.21, 135.57, 134.68, 130.34, 130.02, 128.68, 128.01, 125.51, 124.45, 120.81, 103.49, 103.49. 103. , 86.52, 84.75, 63.29, 30.90, 22.29, 18.83.ESI-MS: m/z [M-Cl]+ = 1097,25.
Synthesis 4,7-bis[4-(N,N-diethylamino)phenyl-5,6-diamino-2,1,3-benzothiadiazole(L2): L2 duobus gradibus perstringitur.Pd(PPh3)4 (46 mg, 0.040 mmol) addita est ad N, N-diethyl-4-(tributylstannyl)anilinum (1.05 g, 2.4 mmol) et solutionem 4,7-dibromo-5,6-dinitro- 2, 1,3-benzothiadiazolum (0,38 g, 1.0 mmol) in sicco toluene (100 ml).Mixtura C° C per 24 horas commota est.Toluene in vacuo evulso, solidum consequens aether petrolei lotum est.Tum mixtura compositi huius (234.0 mg, 0,45 mmol) et pulveris ferri (0.30 g, 5.4 mmol) in acido acetico (20 ml) commota est 80° C. per 4 horas.Reactio mixtionis in aquam effusa est et inde solidum fuscum per filtationem collectum est.Productum bis per vacuum sublimationem purgatum est ut solidum viridis (12,2 mg, 57% cedat).culus.Reputata ad C26H32N6S: C 67,79, H 7.00, N 18.24.Inventus: C. 67.84, H 6.95, H 18.16.1H NMR (600 MHz, CDCl3), δ (ppm) 7.42 (d, 4H), 6.84 (d, 4H), 4.09 (s, 4H), 3.42 (d, 8H), 1.22 (s, 12H).13С NMR (CL MHz, CDCl3), δ (ppm) 151.77, 147.39, 138.07, 131.20, 121.09, 113.84, 111.90, 44.34, 12.77.ESI-MS: m/z [M+H]+ = 461,24.
Composita praeparata et purgata sequentes processus similes RuDA.culus.Reputatur C48H48Cl2N8RuS: C 61.27, H 5.14, N 11.91.Inventus est: C, 61.32, H, 5.12, N, 11.81,1H, NMR (600 MHz, d6-DMSO), δ (ppm) 10.19 (s, 2H), 9.28 (s, 2H), 8.09 (s, 2H). 7.95 (s, 4H), 6.93 (s, 4H), 6.48 (d, 2H), 6.34 (s, 2H), 3.54 (t, 8H), 2.80 (m, 1H), 2.33 (s, 3H), 1.31. (t, 12H), 1.07 (s, 6H).13c nmr (151 mhz, CDCL3), δ (PPM) 158.20, 153.36, 148.82, 148.14, 138.59, 136.79, 135.75, 134.71, 130.44, 128.87, 128.35, 121.70, 111.84, 110.76, 105.07, 104.23, 87.0, 84.4., 38.06, 31.22, 29.69, 22.29, 19.19, 14.98, 12.93.ESI-MS: m/z [M-Cl]+ = 905.24.
RuDA in MeOH/H2O (5/95, v/v) dissoluta est in collatione 10 μM.Imaginum effusio RuDA mensurabatur singulis 5 minutis in Shimadzu UV-3600 spectrophotometer sub irradiatione cum lumine laseris cum necem 808 um (0.5 W/cm2).Imagines ICG scripti sub iisdem conditionibus ac vexillum.
spectra EPR in Bruker EMXmicro-6/1 spectrometri cum proin potestate 20 mW, spectra C G intuens scripta sunt, et modulatio campi 1 G. 2,2,6, 6-tetramethyl-4-piperidone. (TEMP) et 5,5-dimethyl-1-pyrrolini N-oxydi (DMPO) adhibiti sunt ut laqueos nent.Electron spectris resonantiae spinis scripti sunt in solutionibus mixtis RuDA (50 µM) et TEMF (20 mM) vel DMPO (20 mM) sub actione radiationis laseris cum nece 808 um (0.5 W/cm2).
DFT et TD-DFT calculi pro RuDA confecti sunt in PBE1PBE/6-31 G*// LanL2DZ gradus in aquea solutione programmatis Gaussiani 1666, 67,68.HOMO-LUMO, foramen et electronica distributiones humilium industriae unius rei publicae excitatae RuDA machinati sunt programmate GaussView programmatis (versio 5.0).
Primum generandi efficientiam 1O2 RuDA metiri conati sumus utendo spectroscopio conventionali UV-visibilis cum ICG (ΦΔ = 0.002) ut vexillum, sed photodegradationem ICG valde afficit eventus.Ita, quantum cedat 1O2 RuDA mensuratum est deprehendendo mutationem intensio ABDA fluorescentiae circiter 428 um cum laser cum fluctu 808 um (0.5 W/cm2) irradiata.Experimenta fiebant in RuDA et RuDA NPs (20 μM) in aqua/DMF (98/2, v/v) continens ABDA (50 μM).Quantum cedat 1O2 computata est hac formula: ΦΔ (PS) = ΦΔ (ICG) × (rFS/APS)/(rICG/AICG).rPS et rICG rates reactionem sunt ABDA cum 1O2 a photoensitizer et ICG, respective acceptis.APS et AICG absortio photosensitizer et ICG ad 808 um, respective.
Mensurationes AFM factae sunt in condicionibus liquidis utentes scan modum in ratione systematis Icon Bruker in AFM.Utens structuram apertam cum cellulis liquidis, cellae bis lavabantur ethanolo et rivo nitrogenie siccatae.Arentes cellulae in caput microscopii opticum inseres.Statim gutta exempli in piscinam liquidae pone et super cantileveram pone in clystere plastico sterili utente et acus sterili.Alia gutta in specimen protinus ponitur, et, capite optico demisso, duae guttae merguntur, meniscum inter specimen et alveum umorem efformantes.Mensurae AFM factae sunt utens SCANASYST-FLUID V nitride cantilever (Bruker, durities k = 0.7 N m-1, f0 = 120-180 kHz).
HPLC chromatogrammata in Aquas e2695 systema phoenice C18 columna instructum consecuta (250×4.6 mm, 5 µm) adhibitis 2489 UV/Vis detectoris.Necem detector est 650 um.Mobilia A et B aqua et methanolum respective erant, et phaselus mobile rate fluens erat 1.0 ml·min-1.Clivus (solutio B) talis erat: C% ab 0 ad 4 minuta, 100 ad 50% ab 5 ad 30 minuta, et reset ad 100% ab 31 ad 40 minuta.Aes dissolutum est in solutione mixta methanoli et aquae (50/50, per volumen) ad collationem 50 µM.Iniectio voluminis 20 μl.
GPC pertentat in Thermo ULTIMUS 3000 instrumenti instrumenti instructi cum duabus columnis PL aquagel-OH mixtis (2×300×7.5 mm, 8 µm) et ERC RefratoMax520 index refractivus detector.Columna GPC eluctata est cum aqua ad ratem fluens 1 ml/min sub 30°C.Aes NPs solutum est in solutione PBS (pH = 7.4, 50 μM), iniectio voluminis 20 µL.
Imagines photographicae metiebantur in electronico (CHI-660B, Sinarum).Responsiones optoelectronic cum laser conversus et off (808 um, 0.5 W/cm2) mensurabantur ad intentionem 0.5 V in arca nigra, respectively.Vexillum trium electrodis cellulae vitreae carbonis electrode (GCE) ut electrode vitreo Lformato adhibitum est, vexillum calomel electrode (SCE) ut electrode referens, et disci platinum ut electrode calculi.A 0.1 M Na2SO4 solutio ut electrolytici adhibita est.
MDA-MB-231 e linea Cancri pectoris humani emptus est a KeyGEN Biotec Co., LTD (Nanjing, China, catalogue number: KG033).Cellulae monolayri in Dulbecco mutato Medio aquilae (DMEM, glucose altae) creverunt cum solutione serum bovinum foetus 10% (FBS), penicillinum (100 μg/ml) et streptomycinum (100 μg/ml).Omnes cellulae tempore 37°C excultae sunt in atmosphaera humida continens 5% CO2.
Intentatio MTT adhibita est cytotoxicitatem RuDA et RuDA-NPs determinare in praesentia et absentia lucis irradiationis, cum vel sine Vc (0.5 mM).MDA-MB-231 cellulae cancri in 96-bene bracteis creverunt ad densitatem cellulae circiter 1 x 105 cellularum/ml/m/bene et incubatae per 12 horas ante 37.0°C in atmosphaera 5% CO2 et 95% aeris.RuDA et RuDA NPs in aqua dissoluti cellulis additi sunt.Post 12 horas incubationis, cellae expositae sunt ad 0,5 W cm -2 radialem laseris ad necem 808 um per 10 minuta (300 J cm -2) et tunc incubabant in tenebris per 24 horas.Cellae tunc cum MTT incubatae (5 mg/ml) per alias 5 horas erant.Denique medium ad DMSO (200 µl) muta ad crystalla formazans purpurea inde solvenda.OD valores microplate utentes cum necem 570/630 um mensurati sunt.Valor IC50 pro singulis sample utens programmatis SPSS computavit e dosi responsionis curvarum experimentis saltem tribus independens.
MDA-MB-231 cellulae cum RuDA et RuDA-NP tractatae sunt in collatione 50 μM.Post 12 horas incubationis, cellulae laser cum nece 808 um et potentia 0.5 W/cm2 pro 10 min (300 J/cm2) irradiantur.In Vitaminum C (Vc) globus, cellulae 0,5 mM Vc tractatae sunt ante irradiationem laser.Cellulae tunc in tenebris incubae adiectis 24 horis, deinde calcein AM infectae et propidium iodidum (20 μg/ml, 5 μl) per 30 minuta, deinde cum PBS lavantur (10 μl, pH 7.4).imagines cellulis maculatis.